Abstract:

OBJECTIVE:  To  isolate  the  active  component  of  Arca  subcrenata  protein，investigate  the  antitumor  and  immune  activities  in  vitro.  METHODS：The  Arca  subcrenata  protein  active  component  was  extracted  by  ice  water  and  ammonium  sulfate  precipitation.  Cytotoxicity  in  human  rectal  concinoma  HT-29  and  other  cell  lines  treated  with  Arca  subcrenata  protein  active  component  of  50，100，200，400  μg/mL  for  24，48  and  72  h.  Morphology  changes  in  living  cells  were  examined  under  the  inverted  phase  contrast  microscope.  Cellular  and  nuclear  morphological  changes  in  human  tumor  cells  treated  with  the  Arca  subcrenata  protein  active  component  was  studied  by  Giemsa  staining.  Cell  cycle  and  apoptosis  in  HT-29  cells  were  determined  by  flow  cytometry.  The  growth  of  mice  macrophage  RAW264.7  treated  the  Arca  subcrenata  protein  active  component  was  detected  by  MTT  assay.  The  phagocytosis  of  mice  macrophage  RAW264.7  treated  with  Arca  subcrenata  protein  active  component  was  determined  by  neutral  red.  The  NO  production  by  RAW264.7  was  detected  by  Griess  method.  RESULTS：Arca  subcrenata  protein  active  component  inhibited  the  survival  of  many  tumor  cell  lines  in  concentration  and  time-dependent  manners.  Arca  subcrenata  protein  active  component  induced  cell  were  cycle  arrest  at  G2-M  cycle  phases  and  apoptosis  in  HT-29  cells.  It  also  showed  that  multinucleated  cells  were  increased.  Under  the  concentration  of  50-100  μg/mL，Arca  subcrenata  protein  active  component  could  stimulate  the  growth  of  RAW264.7  cells，enhance  phagocytosis  and  NO  production  activity.  CONCLUSION：Arca  subcrenata  protein  active  component  demonstrated  anti-tumor  activities  due  to  its  immune  activation  and  the  fact  that  it  induced  cell  cycle  arrest  at  G2-M  cycle  phases  and  apoptosis.

Key words: Arca , subcrenata, protein, antitumor, immune , activation, G2-M , cell , cycle , arrest, apoptosis